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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
产品简介

       细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。

        检测自噬形成时,使用电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成过程中会发生聚集的现象,因此吉满生物利用hLC3这种现象,构建了带GFP和RFP标记的用于细胞自噬检测的慢病毒和腺病毒产品。无自噬时,RFP-GFP-hLC3融合蛋白弥散在胞浆中,在荧光显微镜下显示为黄色斑点;自噬形成时,由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。RFP是一直稳定表达的,因此通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬流的强弱。


图谱信息

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产品规格
产品货号产品名称包装规格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事项

1. 病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。

4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。


数据展示
保存条件

-80℃保存。(保存时间以12个月以内为宜,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度)


当前位置:产品中心
产品名称产品名称产品名称H_GDF15 Reporter 293 Cell Line
货号
HHXXXXXX01
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细胞培养、冻存、复苏试剂准备
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板块名称六
产品简介
生长分化因子15 (GDF15)是转化生长因子(TGF)-b家族的远端成员,是一种以25 kDa二聚体形式循环的分泌蛋白。它是一种属于转化生长因子β超家族的蛋白质。在正常情况下,GDF-15在大多数器官中低表达,肝、肾、心和肺等器官损伤时表达上调。

神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(glial-cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)家族的GFRAL为GDF15的唯一受体。 GDF15以高亲和力结合GFRAL,但不与GDNF受体家族的其他成员结合,而GFRAL也仅结合GDF15而不结合任何其他GDNF相关配体。GFRAL在结合GDF15后与辅助受体RET结合形成复合物,能够观察到GDNF家族典型的细胞信号,并与RET、AKT、ERK和PLC-γ1的磷酸化相关。

吉满生物H_GDF15 Reporter 293 Cell Line报告基因细胞系,是基于RET-ERK信号通路构建的一种Luciferase报告基因细胞系。当GDF15与其受体GFRAL结合后继续与辅助受体RET结合形成复合物,使RET磷酸化。进一步使ERK磷酸化,激活ELK1。ELK1入核激活荧光素酶(Luciferase)的表达。Luciferase读值即代表信号通路的激活效果,因此可用于GDF15相关药物的体外效果评价。
数据展示
小标题小标题分类一
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小标题小标题分类二
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小标题小标题分类三
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小标题小标题分类四
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细胞培养、冻存、复苏试剂准备
生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin
细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO
Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin 内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容 细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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       细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。

        检测自噬形成时,使用电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成过程中会发生聚集的现象,因此吉满生物利用hLC3这种现象,构建了带GFP和RFP标记的用于细胞自噬检测的慢病毒和腺病毒产品。无自噬时,RFP-GFP-hLC3融合蛋白弥散在胞浆中,在荧光显微镜下显示为黄色斑点;自噬形成时,由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。RFP是一直稳定表达的,因此通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬流的强弱。


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产品规格
产品货号产品名称包装规格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事项

1. 病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。

4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。


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Tel: 400-627-9288
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