产品编号：GM-032AS008
产品名称：H_GARP Latent TGFβ-αvβ6 Blockade Assay
目录价：询价
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产品名称：H_GARP Latent TGFβ-αvβ6 Blockade Assay
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H_GARP Latent TGFB1 Reporter HEK-293 Cell Line
生长培养基：DMEM+10% FBS+1% P.S+4 μg/mL Blasticidin+150 μg/mL Bleomycin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin
细胞冻存液：90% FBS+10% DMSO
H_αvβ6 HEK-293 Cell Line
生长培养基：DMEM+10% FBS+1% P.S+150 μg/mL Bleomycin+125 μg/mL Hygromycin
细胞冻存液：90% FBS+10% DMSO
Assay Buffer：DMEM+10% FBS+1% P.S
调节性T淋巴细胞（Tregs）通过产生转化生长因子-β来发挥抑制免疫过度反应，预防自身免疫性疾病的作用。转化生长因子-β (TGF-β)编码的二聚体前蛋白（proTGF-β），可被furin酶切割出TGF-β前肽，也称为latency-associated peptide（LAP）。紧接着，可通过与潜在TGF-β结合蛋白（latent TGF-beta binding proteins (LTBPs)）结合形成复合物。此外也可同Tregs表面高度表达的GARP(glycoprotein A repetitions predominant，又称为LRRC32)形成复合物，将无活性的TGF-β释放到细胞外基质(ECM)中或积累在细胞表面，后者的结合能力强于前者。随后，通过整合素激活GARP-proTGFβ复合物，形成具有的活性的TGF-β。整合素αvβ6，是由α、β亚单位以非共价键组合组成的跨膜异二聚体，其通过其蛋白结构上的高亲和力结合位点RGD LXXL结合LAP，然后激活latent TGF-β。
H_GARP Latent TGFβ-αvβ6 Blockade Assay是一种生物相关的、以MOA (mechanism of action)为基础的检测方法，可用于测定阻断H_GARP Latent TGFβ/αvβ6相互作用的抗体及其他生物制剂的效能和稳定性。该实验使用两种基因工程细胞系：H_GARP Latent TGFB1 Reporter HEK-293 Cell Line，即稳定表达人GARP基因、Latent TGFβ和TGF-β诱导的荧光素酶报告基因的HEK-293细胞；H_αvβ6 HEK-293 Cell Line，是一种稳定表达人αvβ6的HEK-293 细胞。当两种细胞共培养时，TGF-β被αvβ6切割到培养基中，结合TβRI和TβRII受体，激活转录因子介导的荧光素酶基因（Luciferase）的表达。而加入GARP/αvβ6的阻断抗体后，阻断了TGF-β的活化及由其激活的下游信号通路。阻断抗体对信号通路的影响程度可以通过测定荧光信号评估。
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产品名称：H_GARP Latent TGFβ-αvβ6 Blockade Assay
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H_GARP Latent TGFB1 Reporter HEK-293 Cell Line
生长培养基：DMEM+10% FBS+1% P.S+4 μg/mL Blasticidin+150 μg/mL Bleomycin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin
细胞冻存液：90% FBS+10% DMSO
H_αvβ6 HEK-293 Cell Line
生长培养基：DMEM+10% FBS+1% P.S+150 μg/mL Bleomycin+125 μg/mL Hygromycin
细胞冻存液：90% FBS+10% DMSO
Assay Buffer：DMEM+10% FBS+1% P.S
调节性T淋巴细胞（Tregs）通过产生转化生长因子-β来发挥抑制免疫过度反应，预防自身免疫性疾病的作用。转化生长因子-β (TGF-β)编码的二聚体前蛋白（proTGF-β），可被furin酶切割出TGF-β前肽，也称为latency-associated peptide（LAP）。紧接着，可通过与潜在TGF-β结合蛋白（latent TGF-beta binding proteins (LTBPs)）结合形成复合物。此外也可同Tregs表面高度表达的GARP(glycoprotein A repetitions predominant，又称为LRRC32)形成复合物，将无活性的TGF-β释放到细胞外基质(ECM)中或积累在细胞表面，后者的结合能力强于前者。随后，通过整合素激活GARP-proTGFβ复合物，形成具有的活性的TGF-β。整合素αvβ6，是由α、β亚单位以非共价键组合组成的跨膜异二聚体，其通过其蛋白结构上的高亲和力结合位点RGD LXXL结合LAP，然后激活latent TGF-β。
H_GARP Latent TGFβ-αvβ6 Blockade Assay是一种生物相关的、以MOA (mechanism of action)为基础的检测方法，可用于测定阻断H_GARP Latent TGFβ/αvβ6相互作用的抗体及其他生物制剂的效能和稳定性。该实验使用两种基因工程细胞系：H_GARP Latent TGFB1 Reporter HEK-293 Cell Line，即稳定表达人GARP基因、Latent TGFβ和TGF-β诱导的荧光素酶报告基因的HEK-293细胞；H_αvβ6 HEK-293 Cell Line，是一种稳定表达人αvβ6的HEK-293 细胞。当两种细胞共培养时，TGF-β被αvβ6切割到培养基中，结合TβRI和TβRII受体，激活转录因子介导的荧光素酶基因（Luciferase）的表达。而加入GARP/αvβ6的阻断抗体后，阻断了TGF-β的活化及由其激活的下游信号通路。阻断抗体对信号通路的影响程度可以通过测定荧光信号评估。
