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研究背景

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是慢性肝病最常见的病因之一，也是全球肝硬化和肝细胞癌的主要病因。起因于人们饮食和生活方式的改变，NAFLD的流行率以惊人的速度全球范围内流行，包括慢性乙型肝炎(CHB)流行的亚洲，因而在亚洲NAFLD和CHB同时发生成为一种较为常见的现象。然而脂肪肝发病在CHB预后中的发病机制尚未完全阐明，了解其潜在的分子机制将有助于识别有效的分子诊断标志物和治疗靶点。

文献来源

山东省立医院杨红丽所在课题组等人发表题为：ADAR1 Inhibits HBV DNA Replication via Regulating miR-122-5p in Palmitic Acid Treated HepG2.2.15 Cells的一文，探讨了CHB并发NAFLD患者肝组织中ADAR1和miR-122的表达水平，通过棕榈酸诱导乙肝合并脂肪肝细胞模型，明确了ADAR1通过调控miR-122抑制HBV DNA复制的分子机制。

项目研究

ADAR1是腺苷脱氨酶ADAR最常见的形式，已知参与各种病毒的复制。miR-122作为慢性乙肝肝脏损伤标志物，对HBV表达有抑制作用。因此作者大胆地假设ADAR1可能影响miR-122的表达，从而参与HBV DNA复制的调控。与CHB患者相比，CHB并发NAFLD患者肝组织中ADAR1蛋白和mRNA的表达均显著下调，miR-122表达趋势与此相同。HBeAg蛋白表达明显升高，CHB并发NAFLD患者出现明显的脂肪空泡。

（图1 CHB并发NAFLD患者的肝脏中ADARl、miR-122的表达水平）

为探讨病理状态下CHB并发NAFLD的分子机制，我们采用棕榈酸处理HepG2.2.15建立乙肝合并脂肪肝细胞模型，与对照组相比，诱导模型组的AST和ALT水平均显著升高，HBV DNA、HBeAg浓度以及HBV DNA表达增加。同时，ADAR1表达和脂肪聚积与CHB合并NAFLD患者肝组织中的验证结果保持一致。

（图2 棕榈酸处理的HepG2.2.15细胞中升高的HBV相关标志物）

（图3 ADARl在棕榈酸处理的HepG2.2.15细胞中下调）

作者通过miR-122敲低/过表达分子操作，进一步评估了miR-122在棕榈酸处理的HepG2.2.15细胞中对HBV DNA和HBeAg水平的影响，结果表明miR-122对HBV DNA复制起抑制作用。构建ADAR 1过表达和shRNA慢病毒(Genomeditech)用于感染棕榈酸处理的HepG2.2.15细胞，验证发现miR-122与ADAR1之间呈正相关，ADARl的过表达能够显著抑制HBV DNA和HBeAg的表达，敲低后反之。也就是说，ADAR1负调控肝细胞中的HBV DNA水平，并且证实了这种抑制作用通过增加miR-122水平来实现。