过表达(cDNA)腺相关病毒产品服务是将客户的目的基因的cDNA序列连接到不同的腺相关病毒载体上,通过包装客户指定的血清型获得过表达目的基因的腺相关病毒颗粒。
服务流程:
备注:[1]如不能提供目的基因模板,可只提供序列信息我公司代为合成基因模板
后续服务:
- 多种同类功能试验对阳性基因的验证;
- 体内试验的验证(动物模型);
- 功能基因下游的筛选(敲减后细胞的芯片检测,Western Blot验证等)。
应用实例:
[1]Prasad K M, Xu Y, Yang Z, et al. Robust Cardiomyocyte-Specific Gene Expression Following Systemic Injection of AAV: In Vivo Gene Delivery Follows a Poisson Distribution[J]. Gene Therapy, 2011, 18(1):43.
[2]Passini M A, Macauley S L, Huff M R, et al. AAV vector-mediated correction of brain pathology in a mouse model of Niemann-Pick A disease[J]. Molecular Therapy the Journal of the American Society of Gene Therapy, 2005, 11(5):754.
附表1.可供选择的载体;
附表2.不同血清型AAV的组织嗜亲性;
附表3.不同AAV血清型对相同的组织和细胞具有不同的感染效率;
附表1.可供选择的载体:
编号 |
载体类型 |
载体用途 |
载体元件 |
PGMAAV-4895 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CAG(CAGGSA)-MCS-WPRE |
PGMAAV-4901 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CaMKIIa-MCS-mCherry-WPRE |
PGMAAV-4862 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CaMKIIa-MCS-WPRE |
PGMAAV-4892 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-T2A-eGFP-WPRE |
PGMAAV-4890 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-T2A-mCherry-WPRE |
PGMAAV-4869 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-MCS-3×Flag-WPRE |
PGMAAV-4866 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-MCS-eGFP-3Flag-WPRE |
PGMAAV-4878 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-MCS-WPRE |
PGMAAV-4891 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-EF1a-eGFP-MCS-WPRE |
PGMAAV-4889 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-EF1a-MCS-WPRE |
PGMAAV-4896 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-GFAP-MCS-WPRE |
PGMAAV-4894 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-hSyn-eGFP-MCS-WPRE |
PGMAAV-4907 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-hSyn-MCS-mCherry-WPRE |
PGMAAV-4864 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-hSyn-MCS-WPRE |
PGMAAV-PA0 |
腺相关病毒 |
过表达 |
PGMAAV-CMV-intron-MCS |
PGMAAV-MA2 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-mCherry-MCS-WPRE |
PGMAAV-MA1 |
腺相关病毒 |
过表达 |
GPAAV-CMV-eGFP-MCS-WPRE |
附表2.不同血清型AAV的组织嗜亲性:
吉满生物在包装腺相关病毒时有多种不同的AAV血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的AAV病毒,见下表。
血清型 |
组织亲和性 |
AAV1 |
肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织 |
AAV2 |
中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼, |
AAV3 |
肌肉,肝脏,肺,眼 |
AAV4 |
中枢神经,肌肉,眼,脑 |
AAV5 |
肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺 |
AAV6 |
肺,心脏 |
AAV7 |
肌肉,肝脏 |
AAV8 |
肝脏,眼,中枢神经,肌肉 |
AAV9 |
心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经 |
DJ |
视网膜,肝脏,肺,肾脏 |
DJ/8 |
大脑组织,其他离体组织 |
Rh10 |
肺,心脏,肌肉,中枢神经,肝脏 |
附表3.不同AAV血清型对相同的组织和细胞具有不同的感染效率:
Cell Line |
AAV-1 |
AAV-2 |
AAV-3 |
AAV-4 |
AAV-5 |
AAV-6 |
AAV-8 |
AAV-9 |
AAV-DJ |
AAV-DJ/8 |
Huh-7 |
13 |
100 |
2.5 |
0.0 |
0.1 |
10 |
0.7 |
0.0 |
500 |
0.2 |
HEK293 |
25 |
100 |
2.5 |
0.1 |
0.1 |
5 |
0.7 |
0.1 |
500 |
0.3 |
HeLa |
3 |
100 |
2.0 |
0.1 |
6.7 |
1 |
0.2 |
0.1 |
667 |
0.2 |
HepG2 |
3 |
100 |
16.7 |
0.3 |
1.7 |
5 |
0.3 |
ND |
1250 |
0.5 |
Hep1A |
20 |
100 |
0.2 |
1.0 |
0.1 |
1 |
0.2 |
0.0 |
400 |
0.1 |
911 |
17 |
100 |
11 |
0.2 |
0.1 |
17 |
0.1 |
ND |
500 |
0.0 |
CHO |
100 |
100 |
14 |
1.4 |
333 |
50 |
10 |
1.0 |
25000 |
5.0 |
COS |
33 |
100 |
33 |
3.3 |
5.0 |
14 |
2.0 |
0.5 |
500 |
0.3 |
MeWo |
10 |
100 |
20 |
0.3 |
6.7 |
10 |
1.0 |
0.2 |
2857 |
1.0 |
NIH3T3 |
10 |
100 |
2.9 |
2.9 |
0.3 |
10 |
0.3 |
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